今天小編給大家講講高效液相色譜柱峰形拖尾的9個原因：
1.色譜柱物理損壞
色譜柱有物理損壞是造成峰形拖尾的根源，解決方法就是更換新柱。
2.色譜柱內填料汙染
流動相和樣品中的雜質是色譜柱主要汙染源。
流動相所用的各種溶劑至少是分析純，盡量使用色譜純試劑。
流動相所用的水要是超純水或全玻璃器皿雙蒸水。
用前先用0.45um溶劑微孔過濾(器)過濾，除去可能存在的微粒。
流動相建議現用現配，對於含鹽的溶液尤其注意長置會產生細菌或出現沉澱。
此外還得保證儲存流動相的容器清潔。
複雜樣品可選用0.45um溶劑微孔過濾(器)或樣品預處理柱對樣品進行預處理，確保樣品中不含微粒雜質。
若樣品不便處理，要使用保護柱。
柱內填料汙染時，可將柱頭螺絲卸下，用專用工具挖出柱內前段被汙染填料，再以相同的填料重新填入，修複。
或以能溶解汙染物的流動相按色譜柱使用的相反方向，衝洗色譜柱(約20至30倍柱體積，或視具體情況而定;另外，此時不能接檢測器)，將汙染物衝出色譜柱，再按色譜柱標明的使用方向使用。
3.色譜柱進口處有異物
當斷定是柱進口處有異物時，可將柱頭螺絲卸下，取出濾帽並將其置於20%硝酸溶液中，用超聲波清洗約20分鍾，再置於超純水中，並用超聲波清洗約10分鍾，重新裝入色譜柱內即可。
4.樣品濃度過高致使柱超載
樣品在柱上超載能引起峰展寬，拖尾(或伸舌)。
適當減小進樣量或樣品濃度(需要時，可提高檢測器靈敏度)直至峰形和保留時間不再改變，便可消除這種不良影響。
減小進樣量還能改善其分離度。正常情況下，樣品中每種化合物在150×4.6mm柱中進樣量保持在3～50ug範圍內，不會引起明顯超載。
5.樣品溶劑不對
選擇合適的樣品溶劑，以排除不必要的幹擾。要選用流動相溶解樣品。
6.柱外效應
柱外效應(即進樣閥、色譜柱及檢測器間的管路過長、直徑過粗、管路接頭不匹配、有死體積)是影響色譜柱柱效的主要因素之一。
所以在可能的條件下，色譜柱的兩端連接管路要盡可能短，連接管內徑盡可能細小，切口務必平整光滑，盡可能的減小死體積，以防止因樣品擴散造成不能反映色譜柱真實柱效等情況發生。
7.緩衝不足或不合適
在緩衝不好或離子強度過低的分離中，也會出現保留時間重現性差和峰形拖尾。增加緩衝濃度(與樣品大小相匹配)能改善此情況。
8.矽醇基團作用
仔細分析色譜柱內填料表麵性質可知：反相色譜柱填料的表麵大約被鍵合相覆蓋了一半，其餘的就是未被鍵合的矽醇基團。
所謂的保留是指樣品分子與鍵合相相互作用的結果。
但是，酸性或堿性化合物與矽膠表麵殘存的矽醇基團或金屬雜質之間相互作用而引起雙重保留機理，因此，發生了峰形拖尾。
為了減小峰形拖尾，通常可在流動相加入25mM三乙胺(抑製劑)。三乙胺能與矽醇基團發生強烈的相互作用，從而降低或阻斷樣品分子與矽醇基團的作用，以保證保留機理正常進行，並大大緩解了峰形拖尾。使用長鏈的矽醇基抑製劑，雖起效較慢，但持續力較三乙胺長。
因為抑製劑分子中除了胺基與矽醇基團發生極性作用外，大分子中非極性部分與固定相也會發生反相作用而產生保留現象。如果將抑製劑加至樣品中，效果會顯著。
9.色譜柱內金屬汙染
柱內金屬汙染(Fe，Ni等)可引起某引些化合物峰形拖尾。金屬可由填料本身帶進，也可由腐蝕性流動相緩慢溶解柱進口的金屬濾片，隨流動相沉積到柱填料中。
例如C18柱填料被金屬汙染後，造成酸性/堿性樣品拖尾，可用堿洗/酸洗後再鍵合的填料，得到的峰是尖銳且對稱的。
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