在高效液相分析檢測樣品的過程中,高效液相色譜柱會受到來自於樣品及色譜係統的汙染,從而導致色譜柱耐用性差、壽命縮短。
來自於色譜係統的汙染主要指,HPLC儀器係統中部件磨損而產生的固體顆粒,以及流動相係統過濾不*殘留的固體顆粒。來自於樣品的汙染主要指,未*溶解的樣品或者已*溶解的樣品進入色譜係統中,由於樣品溶劑和流動相溶劑對樣品溶解存在的溶解度差異,導致沉澱析出汙染係統。
特別是對於中藥、天然產物、合成中間體及生物藥品的檢測,因基質的複雜性,高效液相色譜柱受汙染的情況會更加嚴重。汙染會導致色譜係統壓力升高、色譜柱塌陷、填料變色等,從而帶來檢測成本高,測試結果不準確等各種影響。
保護柱是液相色譜分析中重要的色譜耗材,使用保護柱可大大降低分析柱受汙染的程度,延長高效液相色譜柱使用壽命。
保護柱位於進樣器與分析柱之間,作用主要兩方麵:
1.截留不溶性顆粒
2.吸附樣品基質中的雜質
如何選擇保護柱?
1.保護柱的填料,與分析柱保持一致!填料品牌一致,才能100%確保選擇性一致。
2.保護柱的規格,要與分析柱匹配!填料粒徑一致,保護柱的內徑與分析柱的內徑相近。
3.對於精細分離,保護柱本身的裝填柱效要足夠好!
4.對於精細分離或者小內徑色譜柱分離,保護柱的連接死體積要盡可能小。
5.如果是用於UHPLC柱,還要考慮保護柱的耐壓能力。
高效液相色譜柱不理想,就會導致峰擴散,分離度下降,不利於精細分離。