液相色譜柱壓力變化的原因
更新時間:2019-03-12 點擊次數:8480
液相色譜柱在使用過程中,須注意以下六點
1、液相色譜柱在使用前,須先用甲醇或乙腈試劑以20倍柱體積低流速衝洗,作用是使固定相能充分潤濕、碳鏈舒展*,使色譜柱的性能達到更好狀態。具體操作是,將配製好65%的乙腈/水衝洗後,把色譜柱進口端連接在色譜儀上,出口端放空(不可連上檢測器,以免汙染了檢測器),以0.1ml/min~0.5ml/min的低流速將色譜柱中的清稀溶液吹幹,過20分鍾後再接上檢測器,以1.0ml/min的流速,繼續衝洗2~8小時;
2、液相色譜儀檢測分析樣品完畢後,須衝洗c18反相液相色譜柱。尤其是流動相中含有酸或鹽時,需將c18反相液相色譜柱中的酸或鹽衝洗幹淨,通常建議用10%甲醇水衝洗20倍柱體積;
3、若液相色譜柱處於長期閑置狀態時,要將色譜柱*衝洗,建議衝洗3-4小時以上,後保存在純有機試劑或高比例的有機試劑溶液中;
4、由於液相色譜柱的固定相疏水性較強,在使用過程中盡量不要使用高水相條件,若水相比例過高易引起固定相疏水塌陷,引起柱效迅速下降,甚至造成不可逆的負麵影響;由於碳載量高,表現尤為明顯,建議使用過程中水相比例不超過90%;
5、液相色譜柱壓力升高、柱性能下降:通常為色譜柱被汙染,對色譜柱進行再生處理可恢複部分柱效;
6、液相色譜柱壓力驟升:通常由鹽析出或篩板堵塞引起,若是鹽析出,用10%甲醇水低流速衝洗至壓力恢複即可;若判斷並非鹽析出,以純甲醇或10%甲醇水為流動相反衝色譜柱(將色譜柱反接,不接檢測器),若反衝半小時仍無效果則說明反衝無效,需尋找其他原因。